蝙蝠主要在傍晚或夜里飞行寻找食物。根据品种不同，蝙蝠吃的食物有所不同，这些食物包括昆虫、果实和花朵，小型脊椎动物，鱼或者花密。蝙蝠寻找黑暗、隐蔽的地方头朝下睡觉，翅膀在身体附近或紧贴身体折叠起来。它们成群的栖息在大树、洞穴、废弃建筑物、教堂钟塔或悬垂的屋檐下，自己并不筑巢。
蝙蝠也会交谈。一些社交性的信号可以用来吸引配偶、保卫食物、召唤同类以及驱逐一些掠食蝙蝠的动物。这些信号通常采用很低的频率发出（有的时候人类也可以听到），因此，这些声音可以传播很远。同时，这些声音也会因为发声蝙蝠的不同而不同，比如幼小的蝙蝠在和母蝙蝠分开以后会发出“孤独信号”，母蝙蝠会根据发声的不同迅速地分辨出是否是自己的幼崽。另外，许多小型蝙蝠对它们经常使用的回声的频率也很敏感。